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PCR 实验室通风空调设计探讨
发布时间:2022-12-08浏览次数:40

【摘 要】简单描述了医院 PCR 实验室的平面布局及工艺流程;总结了各规范标准与实际使用的需求,提供了PCR实验室各功能房间的空调通风室内设计参数;并对各区域的空调、通风设计进行了详细的介绍。


PCR 技术自 1985 年问世以来,凭其灵敏度高、特异性强、方便快捷、对样品要求低等优点,可测出普通检验难以检测出的病毒,已广泛应用于医院的临床诊断和各防疫检测部门的疫病诊断。但是,这种实验需要有能保证绝对安全、配置合理的实验室和非常规范的操作为前提。近年来对临床基因扩增检验实验室的建设越来越得到重视,因其对检测结果的可靠性、准确性和安全性起到至关重要的作用。

建设 PCR 实验室首先要有规范的管理和内部质量控制流程,其次是分析各医院实验室处理的主要疾病对象,根据病原的生物危害程度、每天实验的数量等,设置相应的通风空调系统。其中要着重考虑实验中交叉污染的控制、室内人员的职业保护和排出物对室外环境的无害化处理。

本文探讨了公立医院在有限的资源下,采取经济合理的方式,建设符合国家相关规范要求,又具有一定前瞻性,对室内的医务人员有所保护,又不对室外环境造成污染的 PCR实验室。供读者参考。

 

一、PCR 实验室概述
SUMMARY

PCR (Polymerase Chain Reaction) 即聚合酶链式反应,又称无细胞分子克隆系统或体外酶促基因扩增法。其基本原理类似于 DNA 的天然复制过程,是在模板 DNA、引物和 4种脱氧核苷酸存在的条件下,依赖于 DNA 聚合酶的酶促合反应,将待扩增的DNA片段与其两侧互补的寡核苷酸链引物经“高温变性——低温退火——引物延伸”三步反应的多次循环,使 DNA 片段在数量上呈指数增加,该技术可以将极微量的靶DNA 特异地扩增上百万倍,从而在短时间内获得所需的大量特定基因片段,因此能在临床上检测单分子 DNA或每 10 万个细胞中仅含 1 个靶 DNA 分子的样品。

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二、PCR 实验室平面布局
LAY OUT

根据《临床基因扩增检验实验室基本设置标准》规定,临床基因扩增检验实验室需要设置试剂储存和准备区、标本制备区、扩增反应混合物配制和扩增区、扩增产物分析区等四个区域。如使用全自动分析仪,区域设置可以适当合并。

虽然 PCR 实验室的四个功能分区是固定的,但各医院在实际布置中却千差万别,其主要布置形式有分散式和集中式两种。

分散式:各实验用房彼此相距较远,呈分散布置形式。各实验之间不易相互干扰。

集中式:完成 PCR 四个实验过程的实验用房相邻布置,形成集中、独立的实验区域。每个实验室应设置独立缓冲间、实验室间应设置带消毒装置的传递窗。

在理想情况下,PCR 实验室缓冲间内,可设置正压,使室内空气不流向室外,室外空气不流向室内。若房间进深允许,可设 PCR 内部专用走廊。在减少室内外空气交换方面,缓冲间比专用走廊更有意义。试剂和标本通过机械连锁传递窗传递,保证试剂和标本在传递过程中不受污染,达到人、物分流。

三 .PCR 实验室的主要功能和设备配置
FUNCTION AND EQUIPMENT

1. 试剂储存和准备区

该实验区主要进行的操作为贮存试剂的制备、试剂的分装和主反应混合液的制备。试剂和用于标本制作的材料应直接运送至该区,不得经过其他区域。试剂原材料必须贮存在本区内,并在本区内制备成所需的贮存试剂。

2. 标本制备区

该区域主要进行的操作为临床标本的保存、核酸 (RNA、DNA) 提取、贮存及其加入至扩增反应管和测定RNA时cDNA 的合成。

本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为正压,以避免从邻近区进入本区的气溶胶污染。另外,由于在加样操作中可能会发生气溶胶所致的污染,所以应避免在本区内不必要的走动。

对具有潜在传染危险性的材料,必须在生物安全柜内开盖,并有明确的样本处理和灭活程序。 

3. 扩增反应混合物配制和扩增区 

该区域主要进行的操作为DNA或cDNA 扩增。此外,已制备的 DNA 模板和合成的 cDNA( 来自样本制备区 ) 的加入和主反应混合液 ( 来自试剂贮存和制备区 ) 制备成反应混合液等也可在本区内进行。在巢式 PCR 测定中,通常在第一轮扩增后必须打开反应管,因此巢式扩增有较高的污染危险性,第二次加样必须在本区内进行。

手术室净化系统。 

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        本文部分摘自公众号(爱德净化供氧)。







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